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广西大学研究生复试实验操纵题预测及技能


发布时间:2022-06-30 09:56:54    作者:kb体育官网   来源:kb体育

  _ 广西大学 2016 年实验操作题预测 (1)平板菌落计数 (2)EDTA 滴定 (3)分光光度计的使用 建议看完本文档后在网上找相关视频学习,这样印象比 较深刻,实验步骤要记住一些关键步骤。 实验操作技能考试技巧 NO.1 中国农业大学食品学院 2006 年复试——实验操作技能考试 2006 年 3 月 29 日,上午考完了专业笔试,中午 1 点进行实验技能的考查。 学生事先提前在体检的时候,报名选好你要参加的实验,有三个,化学实验、机 械实验、微生物实验。任选一个。然后到指定的教室去考。大部分都选了化学实 验。我也是,在食品楼 416 考的。 在考试以前 大家在考场的隔壁实验室准备 有的人拿实验书狂看 有 的在扎堆聊天。名单上有你的名字和考试顺序号 叫号码来考试 就跟医院和银 行一样。考试的地方是进去以后关上门的 没轮到的或者已经考完的都不能逗留 在里面。8 号进去考完之后,出来的时候就喊,9 号、9 号到你了。 里面有三个老师,一个老师考一个内容,同一个时间里面,屋子里面除 了他们只能有 3 个学生,一对一。你三个内容都要考完,顺序无所谓。每个老师 给一个分数,综合起来就是你的实验总得分。 内容一 实验操作。我先走到一个中年女老师面前,她面前放的是一台 分光光度计 725 式。老师“这是什么机器 我答:“分光光度计。”她点头。然 _ 后指着桌子上一瓶液体说“你测一下它的吸光度。”然后我就操作,挺简单,看 看机器里面有没有黑体放进去了,注意测之前要润洗,还要用滤纸擦干滴到外面 的液体,手要拿磨砂的那一面,调零等等。缺点就是那机器是老式的旋钮机器。 我本科时候用的是微电脑按键的。功能都写在按键上,老式的我就不大会用,害 得后来老师还多问了我许多诸如“吸光光度计的原理”之类的问题。 内容二 主要是仪器的识别。一个态度非常好的男老师,面前放着一些玻璃 器皿,拿起几个问我“这个是什么 ,我被问到了球形冷凝管、酸式滴定管和分 液漏斗。然后他指着实验室里面一台机器问“这个是什么 。我被问到了离心机 和旋转蒸发仪。然后他就问我毕业设计做的是什么题目,主要用什么仪器。 最后他问了“怎样测定面粉中的还原糖含量 ”,每个人问题不会都一样,但来 去也就那几个,如果实在答不上来就跟老师说,他会一步一步提示你,点头就行 拉,哈哈。 内容三 实验方案。一个年轻女老师,态度和蔼。她面前放着天平、烧杯 、 容量瓶等几样东西。当然不会让你动手做,只是让你口头说说,仅作为一个提示 把那些东西放在那里。问题是“怎样配 1mol/L 的 NaOH 标准溶液 ,回答有 条理一些就可以。老师很好,会不断提示你。主要是把步骤说清楚,要把她面前 的那些仪器“用”上。我的回答大体如下:黑体加粗的字就是她面前放的东西 看着回答就可以拉。先计算,用 1000ml 容量瓶则需要大概 40g 左右的 NaOH, 则用天平来称。老师问 “怎么称呢 ”,先开天平,放上烧杯,调零,称完后 用蒸馏水溶解。然后用漏斗或者玻棒移液到容量瓶,然后再用蒸馏水洗几次,也 倒入容量瓶。因为 NaOH 遇到水会发热,所以要等几分钟冷却后再加蒸馏水至 刻度然后,标定。也就是用另一个已知浓度的酸来测定该溶液的精确浓度,这需 _ 要用到滴定管。老师又问 “为什么要标定 ,因为我们称量 NaOH 的时候有 误差 NaOH 吸潮,操作中有浓度损失等等,所以要标定才能得知其浓度。 NO.2 实验考试技巧 我选的是化学实验,一百多人中只有三十多个选化学实验,其实化学实验一点都不 难。本来有三组,但是有一个老师有事就只有两组好像(那一组考的是分光光度计), 另外两组实验是这样的。一个是溶液的配制,比如 0.1mlo/L 的 NaoH 如何配制, 他们那一组的好像很快,也很简单;我那一组的是一个刚来的男老师,有一点点严, 他会随机问你一些问题,(这是我问了好多同学总结出来的,他并没有问我)比如 0.235mlo/L 的硫酸钠如何配制,直接称量法和试差称量法有什么区别?在什么情 况下选用什么方法,会给你时间计算什么的,有时让你亲自操作,其实就是用分析 天平称一下东西,然后还让我吸取 10.00ml 的水溶液,这时不能用量筒,老师会问 你为什么不选量筒什么的,之后我就用移液管量取 10ML 的水。最后他让我移取 102 微升的溶液,但是我们不会用那个,他就说就不移了。后来就给我纠正了一些 错误,老师挺好的,实验就是这样。 听说在 08 年复试的时候有考到分光光度计的,好像也不是很难,就是基本操作 吧。我们这一次没考,而且我们这一次时间很仓促,比她们的安排更急一些。总的 来说,中农食品复试的实验还是很简单的,只要你平时做实验用心了,没有多大问 题,专业课的笔试和实验都是要靠平时的积累,所以大家千万别不学专业课。我去 复试前以为自己英语过不了线,所以根本没有准备复试,但是后来我的总评成绩没 有下降,反而上了,我想可能是平常的积累吧。还有好多初试高分到复试时名次降 了好多的……就像粮油方向的一个题目,谷物的散落性那一题,我大三的时候一个 老师都是非逼着我们背,没想到在这些居然派上了用场,那一题 20 分,真的没想到, _ 所以大家千万别因为考研就不学习专业课…… 最后再说说面试吧。联系导师很重要,只要导师肯要你,面试没人会为难你的, 面试时每一个小组一般都是 9 到 10 位老师,开始就是闲聊,问一些学校的情况,你 的成绩,有没有做过科研,你的毕业设计题目是什么?大学期间遇到什么困难,如何 克服……后来就是英语面试,都是很简单的问题,比如你的兴趣爱好,有没有来过北 京,呵呵简单吧。每个人的问题可能都不同,就是这个样子的。至于有人说复试的 时候对外校的学生有歧视什么的,我完全没有感觉到,我可以打保票,绝对没有,中 农食品学院老师的师德让我折报!还有一点要说明的,个人觉得英语要学好,请大 家认真学习英语,绝对不要只是为了考试而学习英语!也有很多初试因为英语过不 了线的,那些都是血的教训啊! _ 广西大学往年实验操作题 (1)722 型光栅分光光度计的使用步骤 1、开启电源,指示灯亮,选择开关置于“T”,波长调置使用波长。仪器预 热 20 分钟。 2、打开试样室盖(光门自动关闭),调节“0”旋钮,使数字显示为“00.0”。 盖 上试样室盖,将比色皿架处于蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透过率 “100%”旋钮,使数字显示为“100.0”。 3、如果显示不到“100.0”,则可适当增加微电流放大器的倍率档数,但尽 可 能倍率置低档使用,这样仪器将有更高的稳定性。但改变倍率后必须按步骤 2 重新校正“00.0”和“100%”。 4、预热后,按步骤 2 连续几次调整“00.0”和“100%”,仪器即可进行测定 工作。 5、吸光度 A 的测量:按步骤 2 调整仪器的“00.0”和“100%”,将选择开置 于“A”,调节吸光度调零旋钮,使得数字显示为“.000”,然后将被测样品移 入光路,显示值即为被测样品的吸光度的值。 6、浓度 C 的测量:选择开关由“A”旋置“C”,将已标定浓度的样品放入 光 路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,即可读出 被 测样品的浓度值。 7、如果大幅度改变测试波长时,在调整“0.00”和“100%”后稍等片刻(因 光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后, 重新调整“00.0”和“100%”即可工作。 8、每台仪器所配套的比色皿,不能与其它仪器上的比色皿单个调换。 _ (2)EDTA 滴定法操作步骤及检测方法 一、目的和使用范围 本试验方法使用于在工地快速测定水泥石灰稳定土中的水泥和石灰的剂量,并可 用以检查拌和的均匀性。 二、仪器设备 1、滴定管(酸式)50ml,一支。 2、滴定台,一个。 3、滴定管夹,一个。 4、大肚移液管:10ml,10 支。 5、锥形瓶:200ml,20 个。 6、烧杯:2000ml(或 1000ml),1 只;300ml,10 只。 7、容量瓶:1000ml,1 个。 8、玻璃棒。 9、量筒:100ml 和 5ml 各一个;50ml2 个。 10、搪瓷杯:容量大于 1200ml,10 只。 11、棕色广口瓶:60ml,1 只(装钙红) 12、托盘天平:60ml,1 只 13、秒表 1 只 14、表面皿直径 9 ㎝,10 个。 15、研体:直径 12—13cm。 16、土样筛:筛孔 2.0mm 或 2.5mm,一个. 17、洗耳球:(1 两或 2 两)1 个。 _ 18、精密试纸:PH12—14。 19、聚乙烯桶 20L,1 个(装蒸馏水);10L,2 个(装氯化铵及 EDTA 二钠标 准液);5L,1 个(装氢氧化钠)。 20、毛刷、去污粉、吸水管、塑料勺、特种铅笔、厘米纸。 21、洗瓶(塑料)500ml,1 只。 三、试剂 1、0.1mol/m3 乙二胺四乙酸二钠(简称 EDTA 二钠)标准液:准确称取 EDTA 二钠(分析纯)37.226g,用微热的无二氧化碳蒸馏水溶解,待全部溶解并冷至 室温后,定容至 1000ml。 2、10%氯化铵溶液:将 500 克氯化铵(分析纯或化学纯)放在 10L 的聚乙烯桶 内,加蒸馏水 4500Ml,充分振荡,使氯化铵完全溶解。也可以分批在 1000ml 的烧杯内配制,然后放入塑料桶内摇匀。 3、1.8%氢氧化钠(内含三乙醇胺)溶液:用 100 克架盘天平称 18 克氢氧化钠, 放入洁净干燥的 1000mL 烧杯中,加 1000mL 蒸馏水使其全部溶解,待溶液冷 至室温后,加入 2mL 三乙醇胺(分析纯),搅拌均匀后储于塑料桶中。 4、钙红指示剂:将 0.2 克钙试剂羟酸钠与 20 克预先在 105℃烘箱中烘 1h 的硫 酸钾混合。一起放入研体中,研成极细粉末,储于棕色广口瓶中,以防吸潮。 四、试验步骤 (一)试验准备 准备 5 种试样,每种 2 个样品(以水泥集料为例),如下: 1 种:称 2 份 300 克集料分别放在 2 个搪瓷杯内,集料的含水量应等于工地预 期达到的最佳含水量。集料中所加的水应与工地所用的水相同(300 克为湿质 _ 量)。 2 种:准备两份水泥剂量为 2%的水泥土混合料试样,每份均重 300 克,并分别 放在 2 个搪瓷杯内。水泥土混合料的含水量应等于工地预期达到的最佳含水量。 混合料中所加的水应与工地所用的水相同。 3 种、4 种、5 种:各准备 2 份水泥剂量分别为 4%、6%、8%的水泥混合料试 样,每份均重 300 克,并分别放在 6 个搪瓷杯内,其他要求同一种。 (二)、试验方法 1、取一个盛有试样的搪瓷杯,在杯内加 600mL10%氯化铵溶液,用玻璃棒充 分搅拌 3 分钟(每分钟搅拌 110—120 次)。如水泥土混合料是细粒土,则也 可以用 100mL 具塞三角瓶代替搪瓷杯,手握三角瓶(瓶口向上)用力振荡 3 分 钟(每分钟 120 次±5 次),以代替搅拌棒搅拌。放置沉淀 4 分钟(如 4 分钟后 得到的是混浊悬浮液,则应增加放置时间,直到出现澄清悬浮液为止,并记录所 需时间,以后所有该种水泥土混合料的试验,均应以同一时间为准),然后将上 部澄清液转移到 300mL 烧杯内,搅匀,加盖表面皿待测。 2、用移液管吸取上层(液面下 1—2cm)悬浮液 10mL 放入 200mL 的三角瓶 中,用量筒量取 50mL1.8%氢氧化钠(内含三乙醇胺)溶液倒入三角瓶中,此时 溶液 PH 值为 12.5—13.0,然后加入钙红指示剂(体积约为黄豆大小)摇匀, 溶液呈玫瑰红色。用 EDTA 二钠标准溶液滴定到纯蓝色为终点,记录 EDTA 二钠 耗量。 3、对其他几个搪瓷杯中的试样,用同样的方法进行试验,并记录各自的 EDTA 二钠的耗量。 _ (3)平板菌落计数法 一、目的要求 学习平板菌落计数的基本原理和方法。 二、基本原理 平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细 胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成 的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数, 根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是,由于待测样品 往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的 2~3 或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。现在常使用菌落形成 单位。 该计数法的缺点是操作较繁,结果需要培养一段时间才能取得,而且测定结果易 受多种因素的影响,但是这种计数方法最大的优点是可以获得活菌的信息,所以 被广泛用于生物制品检验,以及食品、饮料和水等含菌指数或污染度的检测。 三、器材 大肠杆菌悬液,LB 琼脂培养基,1mL、5mL 无菌吸管,无菌平皿, 无菌水,无菌试管,试管架和记号笔等。 四、操作步骤 _ 1、编号 取无菌平皿 9 套,分别标明为 10-4、10-5、10-6 各三套,另取 6 支无菌试管 分别标记为 10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。 2、稀释 用 1mL 无菌吸管吸取 1mL 已充分混匀的大肠杆菌菌悬液,精确地放 0.5mL 至 10-1 的试管中,此即为 10 倍稀释,将多余的菌液放回原菌液中。 将 10-1 试管充分振荡、混匀。另取一支 1ml 吸管插入 10-1 试管中来回吹吸菌 液三次,进一步将菌体分散、混匀。动作不要太猛太快,吸时插入,吹时提出, 再用此吸管吸取 10-1 菌液 1mL,精确地放 0.5mL 至 10-2 试管中,此即为 100 倍稀释,依次类推, 3、取样 用三支 1ml 无菌吸定分别吸取 10-4、10-5、10-6 的稀释菌悬液各 1mL,对号 放入编好号的无菌平皿中,每个平皿放 0.2mL 4、倒平板 尽快向上述盛有不同稀释菌液的平皿中倒入融化后冷却至 45 度的 LB 培养基约 15-20ml,置水平位置迅速旋动平皿,使培养基与菌液混合均匀。 5、培养 倒置于 37 度培养箱中培养 48 小时, _ 6、计数 算出同一稀释度三个平板上的菌落平均数,并按下列公式进行计算; 每毫升中菌落形成单位(cfu)= 同一稀释度三次重复的平均菌落数×稀释倍数 ×5 五、实验报告 1、结果 将培养后菌落计数结果填入下表: 10-4 稀释度 1 2 3 平均 Cfu 数/ 平板 每毫升 的 cfu 数 10-5 1 2 3 平均 10-6 1 2 3 平均 2、思考题 1)为什么溶化后的培养基要冷却至 45℃左右才能倒平板? 2)要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键?为什么? _ 3)同一种菌液用血球计数板和平板菌落计数法同时计数,所得结果是否一样?为 什么? 4)试比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点。 _ (4)实验室折光仪操作规程 目 的: 规范折光仪的操作。 适用范围: 检验室折光仪。 1.操作方法 1.1 将折光仪安置于充分光线的平台上(但不应受日光直接照射),并装上温度计, 必要时可连接恒温器,以保持一定温度。 1.2 将棱镜上透光处朝光源,将镜角拉向检查者,使成一适当倾斜度。 1.3 对准反光镜,使视野内光线最明亮为止,若光线不充足的室内或测定色泽 较深的检品时,可将棱镜上的圆窗打开,以增加光线 将下面的棱镜拉开,用玻璃棒或吸管取检品少许(约 1-3 滴)滴在镜面上, 然后将上下二块棱镜合并旋紧。 1.5 旋转刻度尺旋钮,使读数在检品折光率附近,然后旋转补偿器旋钮,再转 动刻度尺调节钮,使视野内的明暗分界线恰位于十字交叉点处。 1.6 记下刻度尺上的读数和温度,即为该温度时检品的折光率。 1.7 测定完毕后,如检品为水溶液应随即用滤纸条吸去检液,然后滴蒸馏水于 棱镜上,再用滤纸条吸干,反复洗涤三次即可,最后用试镜纸轻轻揩干净,如检 品为油类物质应随即用二甲苯或丙酮或将棱镜按上法揩干净。 _ (5)酸碱滴定法测定混和碱各组分的含量 内容提要 根据甲基橙和酚酞两种指示剂所示终点时消耗的 HCl 标准溶液的体积,计算混和碱中 各组分的含量。 目的要求 了解双指示剂法测定混和碱各组分含量的原理 实验关键 1. 掌握不同指示剂终点时消耗的 HCl 标准溶液的体积与各种碱的量的关系。 2. 基本操作技能的掌握程度(滴定管、移液管)。 实验原理 混和碱是指 Na2CO3 与 NaOH 或 Na2CO3 与 NaHCO3 的混和物,采用双指示剂法的测 定原理和测定过程如下: 用酚酞作指示剂,HCl 标准溶液滴定至溶液刚好褪色,此为第一化学计量点,消耗的 HCl 体积为 V1/ml,有关的反应有 NaOH + HCl = NaCl + H2O NaCO3 + HCl = NaHCO3 + NaCl 继续用甲基橙为指示剂,用 HCl 标准溶液滴定至溶液呈橙色,此为第二化学计量点, 消耗的 HCl 体积为 V2/mL,有关的反应为 NaHCO3 + HCl = NaCl + CO2 + H2O 可见,当混和碱组成为 NaOH 与 Na2CO3 时,V1 V2, V2 0; 当混和碱组成为 Na2CO3 与 NaHCO3 时,V2 V1,V1 0。 由 HCl 标准溶液的浓度和消耗的体积,可计算混和碱中各组分含量。 _ 仪器、药品及材料 0.1mol/L HCl 溶液;0.2%酚酞指示剂,0.2%甲基橙指示剂。 实验步骤 准确移取试液 25.00mL 于锥形瓶中,加入 25mL 去离子水,再加酚酞指示剂 1 ~ 2 滴, 摇匀后用 0.1mol/L HCl 标准溶液滴定,边滴边充分摇动①,滴定至酚酞恰好褪色,即为终 点,记下所用 HCl 标准溶液的体积 V1。然后再加 1 滴甲基橙指示剂,继续用 HCl 标准溶液 滴定至溶液由黄色变为橙色,即为终点,记下所用 HCl 标准溶液的体积 V 终点 ,计算混和碱 各组分的含量。 注释 ① 摇动是为了避免局部 Na2CO3 直接被滴定至 H2CO3。 思考题 滴定混和碱时,如果①V1 = V2;②V1 = 0,V2 0;③V2 = 0,V1 0,试样的组 成如何? 实验记录与结果处理 HCl 溶液滴定混合碱溶液 cHCl : mol/L ; 取样体积: mL 项目 次数 I II III HCl 第二次读数/mL 酚酞 HCl 开始读数/mL 指示剂 V1, HCl /mL V1, HCl /mL 平均值 甲基橙 HCl 最后读数 V 终点/mL 指示剂 HCl 第二次读数/mL _ V2, HCl /mL V2, HCl /mL 平均值 混合碱的组成 混合碱组分 1 的含量/gL-1 混合碱组分 2 的含量/gL-1 1. 根据 V1 和 V2 的体积判断混合碱的组成; 2. 计算混合碱中各组分的含量。 (MNa2CO3 = 106.0g/mol, MNaOH = 40.01g/mol, MNaHCO3 = 84.01g/mol )



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